Purification des peptides et des petites protéines

L’ Ascentis Express Peptide ES-C18 est une colonne HPLC d’analyse ultra-rapide basée sur une nouvelle particule fused-core de 160Å. La particule fused-core est constituée d’un noyau solide de silice entouré d’une couche poreuse de silice de très haute pureté. Cette particule permet d’obtenir de très grandes efficacités pour des solutés de haut poids moléculaire (jusqu’à 20kDa). Cette grande efficacité est due à des chemins de diffusion courts dans la couche poreuse de 0,5µm d’épaisseur et à la faible taille de la particule (2,7µm). La phase greffée Ascentis Express Peptide ES-C18 est protégée de façon stérique et n’est pas end-cappée.

Caractéristiques des colonnes
La particule de fused-core a une surface spécifique de ~ 80 m2/g et taille de pore moyenne de 160Å. Les particules de fused core sont de 30% à 50% plus lourdes que les particules totalement poreuses commercialement disponibles, en raison de la densité de leur noyau solide. En conséquence, la surface spécifique effective par colonne est similaire à celle de colonnes remplies de particles totalement poreuses de surface spécifique 150 - 200 m2/g. Les colonnes Ascentis Express Peptide ES-C18 peuvent être utilisées dans une gamme de pH allant de 1 à 9 et supportent des températures jusqu’à 100 °C.

  

Applications - Peptides, Cartographie peptidique, petites protéines
Pour obtenir les meilleurs résultats avec les colonnes Ascentis Express Peptide ES-C18, nous vous conseillons d’utiliser des phases mobiles composées de méthanol et eu ou acétonitrile et eau. L’utilisation de températures élevées ( par ex. 40 – 100°C) permet de réduire la viscosité de la phase mobile et permet de travailler à des débits plus importants et de diminuer la perte de charge lorsque l’on travaille en haut débit d’échantillon. L’emploi de tampons à 10-50 mM est toujours recommandée pour obtenir des résultats optimum et une stabilité à long terme lorsque l’on a besoin de séparer des composés ionisables. La protection stérique C18 de la phase la rend utilisable aux pH généralement obtenu avec les acides trifluoroacétiques (TFA), et les acides perfluorocarboxyliques, pentafluoropropioniques (PFPA), et heptafluorobutyriques (HFBA) à 0,01-0,1%.

Ces colonnes peuvent également être utilisées pour les separations de peptides pharmaceutiques ou de synthèse.

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