Extract-N-Amp: une technique révolutionnaire pour gagner du temps entre extraction et PCR
Les kits Extract-N-Amp™ sont les premières solutions d'extraction et PCR rapides et intégrées qui ont été développées dans le monde. Ces kits ont été optimisés pour les dosages sanguins, les tissus animaux ou les végétaux. Le protocole ne nécessite pas d'utilisation de colonnes ou de longue étape de digestion enzymatique : c'est une technique simple, rapide, de type «lyse & go ».
Les kits comprennent tous les réactifs, des tampons brevetés, ainsi que les enzymes nécessaires pour extraire rapidement puis amplifier les cibles d'intérêt à partir d'une grande variété de cellules et de tissus. Pour faire la PCR, le ReadyMix™ avec enzyme hot start fourni a été spécialement formulé pour répondre aux contraintes spécifique de cette technique d'extraction rapide. Deux formulations sont disponibles : Extract-N-Amp PCR ReadyMix et REDExtract-N-Amp PCR ReadyMix. Le ReadyMix REDExtract-N-Amp PCR contient un colorant inerte qui sert à visualiser le produit de PCR lors du dépot et de la migration sur gel.
Retrouvez sur internet la video de demonstration du protocole Extract N Amp
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Sigma fournit avec les kits des protocoles validés pour l'extraction et l'amplification d'ADN génomique à partir d'échantillons d'animaux ou de plantes.
Dans un mode opératoire classique, l'ADN génomique est extrait d'un échantillon qui a été incubé dans une solution de préparation et une solution d'extraction à température ambiante. L'échantillon est chauffé et ensuite mélangé avec une troisième solution pour neutraliser les substances inhibitrices de PCR avant de réaliser cette PCR. Une partie de l'ADN ainsi extrait est ensuite ajoutée à un mix PCR contenant des amorces et le Readymix inclus dans le kit. Le reste de l'ADN peut être conservé à 4 degrés ou congelé et conservé ainsi pendant plusieurs mois.
Applications les plus fréquentes :
• Genotypage• Détection de transgènes
• Analyse de knockout
• Séquençage
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